Πέμπτη 28 Μαρτίου 2024

ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ DNA ΑΠΟ ΜΠΑΝΑΝΑ

 Τα υλικά που θα χρειαστούμε για το πείραμα είναι : 

  • μισή μπανάνα (κατά προτίμηση ώριμη), 
  • 100 ml νερό, 
  • 10 ml υγρό απορρυπαντικό πιάτων, 
  • 1 κουταλιά του γλυκού αλάτι , 
  • παγωμένη αιθυλική αλκοόλη (οινόπνευμα) 

  1. Αρχικά πολτοποιούμε πολύ καλά τη μισή μπανάνα σε γουδί .  
  2. Στη συνέχεια σε ένα ποτήρι ετοιμάζουμε το υδατικό διάλυμα ή διάλυμα εκχύλισης, το οποίο αποτελείται από 100 ml νερό, 10 ml υγρό απορρυπαντικό πιάτων και 1 κουταλιά του γλυκού αλάτι (Το υγρό απορρυπαντικό πιάτων θα διαλύσει τα φωσφολιπίδια της κυτταρικής και πυρηνικής μεμβράνης, καταστρέφοντας με αυτόν τον τρόπο τις μεμβράνες των κυττάρων της μπανάνας, με αποτέλεσμα να βγει από τα κύτταρα το DNA. Το αλάτι, NaCl, διίσταται στα ιόντα Na+ και Cl- . Τα ιόντα Na+ αντιδρούν με τις ελεύθερες φωσφορικές ομάδες των μορίων του DNA λειτουργώντας έτσι ως «κόλλα» για να ενωθούν μεταξύ τους πολλά μόρια DNA προκειμένου να είναι ορατά με γυμνό μάτι.). 
  3.  Ανακατεύουμε πολύ καλά με ένα κουτάλι μέχρι να διαλυθεί τελείως το αλάτι. 
  4.  Στον πολτό μπανάνας προσθέτουμε αρχικά μικρή ποσότητα του διαλύματος εκχύλισης και συνεχίζουμε την πολτοποίηση. 
  5.  Ρίχνουμε τον πολτό που προκύπτει σε δοκιμαστικό σωλήνα ή σε ένα ψηλό και λεπτό ποτήρι και προσθέτουμε λίγο ακόμα από το διάλυμα εκχύλισης αναδεύοντάς το (Στο ποτήρι υπάρχουν πλέον όλα τα συστατικά ενός κυττάρου, δηλαδή DNA, RNΑ, πρωτεΐνες, υδατάνθρακες, λιπίδια). 
  6.  Μέσα στον δοκιμαστικό σωλήνα ρίχνουμε παγωμένη αιθυλική αλκοόλη (οινόπνευμα). Παρατηρούμε ότι προκύπτει μια διαυγής φάση πάνω από το ήδη υπάρχον διάλυμα (δηλαδή το οινόπνευμα δεν διαλύεται). Το DNA και το RNA «φεύγουν» από το διάλυμα και ανεβαίνουν στη φάση του οινοπνεύματος. (Αυτό συμβαίνει γιατί οι αζωτούχες βάσεις των νουκλεϊκών οξέων είναι υδρόφοβες με αποτέλεσμα να φεύγουν από το υδατικό διάλυμα και να μεταφέρονται στο οινόπνευμα). 
  7. Το DNA που εντοπίζεται στο οινόπνευμα μοιάζει με ίνες από βαμβάκι. Μάλιστα όσο περισσότερη ώρα αφήσουμε το διάλυμα , τόσο περισσότερο DNA θα μεταφερθεί στη φάση του οινοπνεύματος. (Για να επιταχύνουμε τη διαδικασία μπορούμε με μία οδοντογλυφίδα να αφαιρέσουμε - «ψαρέψουμε» το DNA από το διάλυμα και να το μεταφέρουμε στη φάση του οινοπνεύματος). 


 Καλή επιτυχία!

ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ DNA

 ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ DNA ΣΤΟ ΣΧΟΛΙΚΟ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ